1、pcr的模板可以是蛋白质PCR模板制备是PCR实验的首要步骤,模板制备是从待分析样本中纯化和浓缩核酸DNA或RNA以作为PCR扩增模板的过程由于PCR用途多样,用于提取核酸的材料可能是全血动植物组织培养细胞口腔涂片体液。
2、你好,你要扩增哪里,那里就是你的说的目的片段和基因本身没有什么具体关系可以扩增基因内的一部分序列内含子也好外显子也好内含子+外显子也好,可以扩增基因外的间隔序列,完全是根据实验需要来定的。
3、因为两个模板显示出形式不一样做的时候一般是提取植物总的RNA,然后采用OligodT或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA再以cDNA为模板进行PCR扩增,主要是获得目的基因或检测基因表达,判断目的基因mRNA转录水平的相对量的变。
4、第二种从mRNA逆转录获得,在这种情况下,mRNA的cDNA,与原来的基因组DNA相同而且无内含子相反地,对应于在原来基因中没有的而在mRNA存在的3#39末端的poly A序列等的核苷序列上,与外显子序列先导序列以及后续序列等一起。
5、应该是指样品中DNA样品的来源或种类例如,如果提取的是基因组DNA,由于基因组DNA数量比较多,引物可能会与多个位点结合,需要优化PCR条件,否则可能获得非特异扩增,或是没有扩增结果而如果纯化的是质粒DNA,模板复杂度就低。
6、1首先PCR是体外大量扩增目的DNA的技术你问模板DNA是什么,这是不需要问的,你想扩增的目的基因是什么什么就是模板你用cDNA来做PCR模板当然是cDNA双链了一定是双链cDNA做模板,引物当然不是cDNA了,而是可以与。
7、PCR技术的基本原理该技术是在模板DNA引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中。
8、PCR合成的时候当然不只是需要引物,模板链也就是目的基因片段是必须的因为DNA聚合酶合成DNA时只能从一段已有的DNA片段往上加脱氧核苷酸延伸子链,而不能从头合成,所以需要一段引物引物就是目的基因在5#39段的一小段序列。
9、quot所以做PCR,用反转录得到的cDNA做引物quot你这个理解是不对的,cDNA就是是作PCR模板用的mRNA反转录的时候,是会有片段断裂或者不完整,但是,mRNA的拷贝数有几十万甚至几千万个,不会每个mRNA拷贝在你扩增的目的基因处都。
10、RNA做模板就是所谓的反向PCR了耐高温不是聚合酶的通性,聚合酶一般都不耐高温,所以虽然PCR的思想早就有了,但是因为没有耐高温的聚合酶所以才无法付诸实践,直到后来从水生栖热菌中发现了Taq才使得PCR被广泛使用。
11、注意事项 首先是确定的总体积,可以选择10ul, 20ul, 50ul等其次是根据mix,算出总体积中mix使用的体积根据自己提取或者逆转录得到的DNA浓度,以及一次pcr反应所使用模板的量,计算出DNA的体积根据引物浓度以及引物使用。
12、引物是用来限制目的序列位置的,左右两端各需要一个引物限制,所以是两条模板是已经确定含有目的DNA序列的基因细胞液溶液等等,只要你确定里边含有目的基因,就可以通过PCR将其大量扩增。
13、你可以理解为打印文件,需要模板就是要复制,所以要找到需要的基因片段,用剪切酶取出来,不需要模板就是可以写文件直接打印出来,最后都是复制。
14、两个都可以双链当然可以,单链的话只要与其中一个引物结合延伸,就成双链了。
15、在实时荧光PCR中模板的定量有2种方法绝对定量和相对定量绝对定量一般通过已知的标准曲线来确定我们所感兴趣基因的拷贝数相对定量指在一定样品中靶序列相对于另一参照序列的量的变化如果你做的是DNA的定量,可以用DNA。
16、pcr需要的原料有物PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链酶dNTP模板和缓冲液PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温经常是60°C左右时引物与单链按碱基互补配对的原则结合。
17、1引物和模板在加之前离不离心 跟以后有没有条带没有关系PCR没有条带一般是因为各物质之间的比例或者退火温度不合适,你需要调整和优化每换一种试剂都要重新优化PCR条件2把水bufferDntpmg离子做一个mixture。
18、PCR即聚合酶链式反应Polymerase chain reaction的缩写,它是体外酶促合成特异DNA片段的方法这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物,在含有引物待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系。